ИЗУЧЕНИЕ УСЛОВИЙ ПОЛУЧЕНИЯ ФИЦИН-СОДЕРЖАЩЕГО СЫРЬЯ
Коммерческие препараты фицина получают из незрелых плодов F. сarica. При выращивании каллуса этого растения выявлена протеаза, похожая на фицин. В опытах изучено влияние различных сочетаний фитогормонов на протеолитическую активность каллуса F. carica. Результаты данных исследований позволяют наметить пути использования этого метода в контролируемом производстве фицин-содержащего сырья.
Ранее нами было проведено изучение протеолитической активности латекса F. carica, которая составила 213 γ/мл. Использованный нами метод, его авторами был разработан при изучении протеаз Carica papaya. Поскольку фицин является цистеиновой протеазой, при определении протеолитической активности в плодах Ficus carica в реакционную смесь вносили активирующие добавки: цистеин-HCl, в концентрации 5·10⁻²М и ЭДТА - 2 ·10⁻².
Определена оптимальная величина pH при выявлении максимальной протеолитической активности. При pH 6,5 она составила 207, 98; при pH 8,0 - 225,35; при pH 9,0 - 187,79. Таким образом, оптимум протеолитической активности проявился при pH 8,0.
Представляется целесообразным продолжить ранее проводимые исследования. Предварительные результаты исследований показывают, что для получения каллусной ткани F. carica in vitro можно использовать его соплодия на ранних стадиях развития (до 2 см). Эти данные полезны в плане разpaбатываемой технологии, так как пока не выяснено из какой ткани более интенсивно идет накопление исследуемого ингредиента: в каллусной массе или в цветочных структурах.
Были испытаны следующие сочетания регуляторов роста:
- 0,3 мг/л индолилуксусной кислоты (ИУК) + 3,0 мг/л бензиламинопурина (БАП);
- 0,3 мг/л индолил-пировиноградной кислоты (ИПК) + 3,0 мг/л 6БАП;
- 0,3 мг/л ИУК + 0,3 мг/л ИПК + 3,0 мг/л 6БАП, на фоне 2 прописей макросолей:
а) по АС № 1608845 /2/
б) по Мурасиге-Скугу /5/
По АС № 1608845 получен светло-зеленый каллус, по Мурасиге-Скугу - темно зеленый. Наилучшая приживаемость отмечена на среде по АС № 1608845 при введении смеси ауксинов (ИУК+ИПК) и БАП и составила 88%, что согласуется с данными об активации ауксинов индолил-ПВК при укоренении древесно-декоративных растений.
В опытах установлено ускорение нарастания каллуса при добавлении к ауксинам 2,4-Д, в концентрации 2 и 5 мг/л. Как показали результаты исследований, наиболее интенсивное нарастание каллуса происходило на среде с 5 мг/л 2,4 Д; 0,5 кинетина и 10 - ИУК, наиболее слабое - при исключении ИУК и уменьшении концентрации 2,4 Д. При проведении опытов с активированным углем через 28 дней отмечено увеличение массы каллуса до 546 мг на пробирку против 526 мг в контроле. Деление каллуса проводили на 2-3 части и высаживали на среду, в одну колбу. В течение двух месяцев нарастания каллус срастался, образуя один конгломерат неправильной формы. Предстоит изучить минимальную массу каллуса при его пассажах, которая обеспечивает жизнеспособность каллусной ткани.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Отработана методика введения в культуру in vitro тканей растений F. carica. Изучено влияние различных вариантов питательных сред на скорость нарастания каллуса. Получены стерильные культуры каллуса F. carica сорта Лардаро, в количестве, достаточном для получения суспензионной культуры клеток. Проведено изучение протеолитической активности незрелых плодов и выделен ферментный препарат. Оптимизированы условия питания стeблевых верхушек и получены стерильные растения, пригодные для разработки методики микроразмножения в культуре in vitro. Отработана методика акклиматизации растений при переводе в культуру in vivo.
Статья в формате PDF 105 KB...
22 04 2024 9:43:46
Статья в формате PDF 107 KB...
21 04 2024 21:45:29
20 04 2024 3:28:19
Статья в формате PDF 235 KB...
19 04 2024 12:26:18
Статья в формате PDF 106 KB...
16 04 2024 11:49:24
Статья в формате PDF 115 KB...
15 04 2024 5:43:50
Статья в формате PDF 111 KB...
14 04 2024 18:56:49
Статья в формате PDF 127 KB...
12 04 2024 1:28:57
Статья в формате PDF 102 KB...
11 04 2024 15:39:36
Статья в формате PDF 244 KB...
10 04 2024 8:51:49
Статья в формате PDF 125 KB...
08 04 2024 22:31:52
Статья в формате PDF 122 KB...
07 04 2024 16:26:54
Статья в формате PDF 300 KB...
06 04 2024 20:40:37
Статья в формате PDF 119 KB...
04 04 2024 7:30:17
03 04 2024 4:28:14
Статья в формате PDF 121 KB...
31 03 2024 21:22:51
Статья в формате PDF 127 KB...
30 03 2024 15:50:46
Статья в формате PDF 110 KB...
29 03 2024 14:28:28
Статья в формате PDF 305 KB...
28 03 2024 7:25:13
Статья в формате PDF 113 KB...
27 03 2024 14:50:20
Статья в формате PDF 284 KB...
26 03 2024 9:26:35
Статья в формате PDF 140 KB...
25 03 2024 4:10:41
Статья в формате PDF 175 KB...
24 03 2024 11:35:48
Предложены офтальмологические лекарственные формы с ортофеном - глазные лекарственные пленки и пролонгированные глазные капли. Разработан их состав, технология длч производства в аптечных условиях, стандартизация. Проведены подробные биофармацевтические исследования in vitro по выбору оптимальных вспомогательных компонентов. Выбран способ количественного анализа ортофена в разработанных лекарственных форм - с помощью спектрофотометрии. ...
23 03 2024 11:35:32
Статья в формате PDF 126 KB...
22 03 2024 14:17:59
Статья в формате PDF 116 KB...
21 03 2024 23:41:32
Статья в формате PDF 120 KB...
20 03 2024 2:58:32
Статья в формате PDF 118 KB...
19 03 2024 9:54:22
Статья в формате PDF 103 KB...
18 03 2024 23:50:30
Статья в формате PDF 131 KB...
17 03 2024 23:20:54
Статья в формате PDF 121 KB...
16 03 2024 1:23:24
Статья в формате PDF 110 KB...
15 03 2024 6:19:19
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::