СТАЦИОНАРНОЕ И РОЛЛЕРНО-СУСПЕНЗИОННОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МЕЖВИДОВОЙ ГИБРИДНОЙ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК СВИНЬЯ Х ЛОШАДЬ (А4ХL)
Метод гибридизации соматических клеток является одним из перспективных биотехнологических подходов, который находит все более широкое применение в вирусологии и биотехнологии.
В лаборатории клеточной биотехнологии была получена гибридная культура клеток А4хL (почка свиньи ТК- х лимфоциты лошади), состоящие из популяций эпителиоподобного и лимфоцитоподобного типов клеток. Сроки формирования монослоя 3-4 сутки, индекс пролиферации составил - 7,3-8,1, митотический индекс - 30‰. Модальный класс хромосом клеток гибридной культуры А4хL составлял 40 на 20 пассаже. Интервал изменчивости хромосом в клетках на 20 пассаже 30-40 хромосом.
Гибридные клетки А4хL высоко чувствительны к вирусу гepпeса лошадей и ринопневмонии лошадей.
После 16 летнего хранения в жидком азоте восстановлена культура клеток А4хL, заложенная на 10 пассаже. На данный период культура прошла 40 пассажей. Жизнеспособность клеток на 0 пассаже составила 80%. Через 4-5 пассажей восстановлены культурально-морфологические показатели: монослой формировался на 3-4 сутки, коэффициент пересева 1:7-1:8, индекс пролиферации 7,25-8,1.
На цитологических препаратах культура представлена клетками двух типов - эпителиоподобными и лимфоцитоподобными.
Эпителиоподобные клетки полигональной формы, ядра клеток крупные неправильной формы, ядерная мембрана утолщена, количество ядрышек 1-2. Наблюдаются двуядерные клетки. Модальный класс хромосом на 20 пассаже представлен 38 хромосомами, что составляет 51% от общего числа. В процессе стационарного культивирования часть клеток уходит в суспензию и образует конгломераты в питательной среде. Клетки, снятие со стекла и уходящие в суспензию были использованы для получения суспензионных клонов из опорозависимой культуры. Было поставлено 10 опытов с использованием различных питательных сред: ИГЛА МЕМ с 2 наборами аминокислот и витаминов, 199, Игла МЕМ, ДМЕМ и разной концентрации клеток в спинере и роллерных условиях.
В условиях роллерно - суспензионного культивирования, с использованием среды Игла МЕМ с двойным набором аминокислот и витаминов с добавлением сыворотки КРС 15-20%, а также глюкозы(4 гл) и глютамина (600 мкгмл), через двое суток наблюдали увеличение концентрации клеток в 5-6 раз. В суспензии живых клеток было 80%. Через трое суток культивирования наблюдали уменьшение живых клеток.
На цитологических препаратах наблюдали сохранение лимфоцитоподобных клеток.
Статья в формате PDF 329 KB...
25 04 2024 11:59:33
Статья в формате PDF 233 KB...
23 04 2024 23:57:55
Статья в формате PDF 321 KB...
22 04 2024 3:50:45
Статья в формате PDF 194 KB...
21 04 2024 10:25:39
Статья в формате PDF 221 KB...
20 04 2024 1:44:28
Статья в формате PDF 112 KB...
19 04 2024 10:27:39
Статья в формате PDF 590 KB...
17 04 2024 21:31:51
Статья в формате PDF 127 KB...
16 04 2024 23:50:44
Статья в формате PDF 144 KB...
15 04 2024 15:19:29
Статья в формате PDF 112 KB...
14 04 2024 3:31:41
Статья в формате PDF 126 KB...
13 04 2024 8:43:12
12 04 2024 1:32:41
Статья посвящена авторской методологии прогнозирования экономического потенциала региона на примере Краснодарского края. В ходе научных исследований был разработан оригинальный математический аппарат, позволяющий оценить основные экономические показатели региона, который применяется для социально-экономического прогноза региона на текущий и перспективный периоды. Описательная часть содержит основные подходы и этапы эффективного экономического прогнозирования региона. ...
11 04 2024 5:51:33
Статья в формате PDF 278 KB...
10 04 2024 21:18:36
Статья в формате PDF 100 KB...
09 04 2024 8:11:29
Статья в формате PDF 187 KB...
08 04 2024 5:47:11
Статья в формате PDF 114 KB...
07 04 2024 7:53:21
Возникшее при низкодозовом радиационном воздействии повышение уровня ТТГ, снижение уровня тиреоидных гормонов, истощение симпатической импульсации и вегетативный дисбаланс, свидетельствует об установившейся адрено-тиреоидной дисфункции в организме жителей молодого (21–30 лет) и пожилого возраста (61–70 лет) проживающих в районах, прилегающих к Семипалатинскому ядерному полигону. ...
06 04 2024 8:53:10
Статья в формате PDF 120 KB...
05 04 2024 1:17:42
Статья в формате PDF 135 KB...
04 04 2024 3:31:10
Статья в формате PDF 113 KB...
03 04 2024 8:16:10
Статья в формате PDF 110 KB...
02 04 2024 12:32:23
Статья в формате PDF 240 KB...
01 04 2024 8:16:39
Статья в формате PDF 105 KB...
31 03 2024 21:52:30
Статья в формате PDF 118 KB...
29 03 2024 1:56:38
Статья в формате PDF 262 KB...
28 03 2024 5:14:16
27 03 2024 11:13:19
26 03 2024 0:32:36
Статья в формате PDF 103 KB...
25 03 2024 0:46:31
Статья в формате PDF 251 KB...
24 03 2024 19:14:11
Статья в формате PDF 190 KB...
23 03 2024 7:31:16
Статья в формате PDF 100 KB...
22 03 2024 12:45:44
Статья в формате PDF 120 KB...
20 03 2024 12:13:59
Статья в формате PDF 111 KB...
19 03 2024 0:13:23
Статья в формате PDF 132 KB...
18 03 2024 3:32:29
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::