МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КОЛОНИЙ, ФОРМИРУЕМЫХ СТРОМАЛЬНЫМИ КЛЕТКАМИ- ПРЕДШЕСТВЕННИКАМИ, ЦИРКУЛИРУЮЩИМИ В ПЕРИТОНЕАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ
Предшествующими исследованиями (Кейлис-Борок И.В., 1979; Фриденштейн А.Я., Лурия Е.А., 1980; Лурия Е.А. с соавт., 1989; Лебединская О.В., 1999 и др.) доказано наличие в биологических жидкостях организма циркулирующих стромальных клеток-предшественников (КОК-ф).
В данной работе исследованы морфологические особенности колоний, формируемых клетками-предшественниками стромы в монослойных культурах одной из важнейших биологических жидкостей - перитонеального трaнcсудата.
Опыты проводились на крысах линии Wistar. Для извлечения клеток перитонеального трaнcсудата забитым животным вводили интраперитонеально 10 мл среды 199, содержащей 250 Ед гепарина и 800 мг гентамицина, затем отсасывали содержимое и пропитывали полость еще раз 10 мл среды. Клеточные суспензии эксплантировали в культуральные матрасы в 5 мл среды α-МЕМ с телячьей сывороткой по 1х105 - 10х106 ядросодержащих клеток на матрас.
Исследовались полные и адгезивные культуры с добавлением фидера и при его отсутствии. В качестве фидера использовали облученные костномозговые клетки морской свинки, содержащие тромбоцитарные ростовые факторы, которые, как известно, необходимы для пролиферации КОК-ф костного мозга мышей и крыс.
Колонии, сформированные циркулирующими в перитонеальном трaнcсудате клетками-предшественниками, окрашивали азур II-эозином и подсчитывали процентное содержание трех типов колоний, содержащих не менее 50 клеток.
Каждая из колоний представляет собой клон, состоящий из фибробластов. Первый тип - компактные колонии - содержат фибробласты, типичные по форме, обладающие высоким пролиферативным потенциалом, что обусловливает их плотное расположение в одном или нескольких центрах. Второй тип - диффузные колонии - хаpaктеризуются наличием в своем составе фибробластов, разобщенных между собой и свободно располагающихся в пределах колонии. Третий тип колонии содержит сквамозные фибробласты - крупные округлые или малоотростчатые клетки с множественными вакуолями в цитоплазме. Три морфологических типа колоний отражают степень пролиферативной активности входящих в них клеток: максимальную - в компактных колониях и минимальную - в колониях, содержащих сквамозные клетки.
Результаты исследований показали, что преобладание того или иного типа колоний зависит от плотности эксплантируемых клеток и наличия фидера в культурах. Максимальное количество пролиферативно-активных компактных колоний наблюдалось при эксплантации 3х105 ядросодержащих клеток при добавлении фидера и от 1х105 до 5х105 клеток на матрас без фидера. Причем введение фидера в культуры с данной концентрацией клеток приводило почти к 100-процентному образованию колоний компактного типа (98,5%). Увеличение количества эксплантируемых клеток до 1,5х106 на матрас при наличии фидера и до 10х106 в полных и адгезивных культурах без фидера вызывало резкий рост числа колоний, содержащих сквамозные клетки.
Таким образом, оптимальное соотношение количества эксплантируемых клеток в культуре и концентрации фидера позволяет в полной мере проявить пролиферативные возможности стромальных клеток-предшественников, выявленных в перитонеальном трaнcсудате крыс.
Статья в формате PDF 338 KB...
01 05 2024 13:36:43
Статья в формате PDF 121 KB...
30 04 2024 17:39:28
29 04 2024 20:15:38
Статья в формате PDF 155 KB...
28 04 2024 13:50:22
Статья в формате PDF 987 KB...
25 04 2024 16:16:35
Статья в формате PDF 126 KB...
24 04 2024 11:51:24
Статья в формате PDF 119 KB...
23 04 2024 15:23:19
Статья в формате PDF 322 KB...
22 04 2024 0:51:22
Статья в формате PDF 120 KB...
21 04 2024 17:45:23
19 04 2024 11:33:37
Статья в формате PDF 164 KB...
18 04 2024 15:14:58
17 04 2024 14:20:47
Статья в формате PDF 123 KB...
16 04 2024 3:20:54
Статья в формате PDF 138 KB...
15 04 2024 22:38:40
Статья в формате PDF 153 KB...
14 04 2024 22:19:34
Изучена коагулирующая способность фторида аммония при выделении каучука из латекса СКС- 30АРК. Исследовано влияние температуры и концентрации раствора фторида аммония на полноту коагуляции. Проведена оценка свойств резиновых смесей и вулканизатов на основе каучука СКС-30 АРК, выделенного из латекса фторидом аммония. ...
13 04 2024 5:59:17
Статья в формате PDF 100 KB...
12 04 2024 4:30:39
Статья в формате PDF 507 KB...
11 04 2024 4:55:33
Статья в формате PDF 194 KB...
10 04 2024 9:28:46
Статья в формате PDF 245 KB...
09 04 2024 0:44:13
Статья в формате PDF 291 KB...
07 04 2024 12:42:38
Статья в формате PDF 133 KB...
06 04 2024 22:37:54
Статья в формате PDF 124 KB...
04 04 2024 15:15:30
Алтайский край разнообразен по рельефу, климату и почвам. Включает 5 природных зон – от сухой степи до увлажнённых предгорий. Гречиха посевная выращивается на всей территории края, однако её посевы наиболее продуктивны в условиях лесостепи, что связано с природными ресурсами и развитым пчеловодством. Применение зонального агротехнического комплекса в лесостепи позволяет получать высокий урожай зерна (1,5–2,0 т/га). ...
03 04 2024 10:31:47
Статья в формате PDF 317 KB...
02 04 2024 15:59:58
Статья в формате PDF 103 KB...
01 04 2024 19:30:41
Статья в формате PDF 110 KB...
31 03 2024 9:15:19
Статья в формате PDF 114 KB...
30 03 2024 14:37:57
Статья в формате PDF 123 KB...
28 03 2024 20:42:42
27 03 2024 11:39:19
Статья в формате PDF 102 KB...
25 03 2024 8:39:14
Статья в формате PDF 117 KB...
24 03 2024 14:47:20
Статья в формате PDF 183 KB...
23 03 2024 0:38:25
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::