Штаммовые отличия Yersinia pestis по чувствительности к бактерицидному действию полимиксина В
Целью настоящего исследования было сравнение уровня чувствительности к полимиксину В штаммов чумного микроба с известной структурой липоолигосахаридов (Knirel et al., 2003), а также изучение взаимодействия данного катионного пептида с живыми клетками Yersinia pestis, выращенными в различных условиях, и с выделенными из них препаратами ЛОС.
Культуры чумного микроба выращивали на чашках со средой Хоттингера или в L-бульоне при температуре 25 С или 37 С. Препараты ЛОС выделяли методом C. Galanos et al. (1969). Устойчивость к полимиксину определяли методом серийных разведений в L-бульоне в 96-луночных планшетах Cellstar. Наличие роста фиксировали по увеличению оптической плотности (OD = 595 нм) на приборе Multiskan (Labsystems). Определение уровня сорбции полимиксина В живыми клетками и препаратами ЛОС, а также изучение влияния полимиксина В на проницаемость клеток для лизоцима проводили, как описано в работе M. Skurnik et al. (1999).
По уровню чувствительности к полимиксину В изученные штаммы Y. pestis подразделяются на две группы: устойчивые - минимальная подавляющая концентрация (МПК) полимиксина В > 200 мкг/мл (KM260(11), 358/12, Tjiwidej, KM218, KIMD1, Colombo, K1(780), ЕV НИИЭГ) и чувствительные -
МПК полимиксина В 6-50 мкг/мл - (EV11M, 1146,17/18, 261ЖВР, 262ЖВР). Показано, что при выращивании клеток при температуре 25 С устойчивость выше, чем при выращивании при температуре 37 С. Например, для штамма Y. pestis KIMD1 МПК полимиксина В в этих условиях составляла 12500 мкг/мл и 390 мкг/мл соответственно. Интересно, что сорбция полимиксина В живыми клетками отмечена как для чувствительных, так и для устойчивых штаммов. Однако количество сорбированного антибиотика было несколько выше для клеток чувствительных штаммов Y. pestis (1,8 мкг/103 к.о.е. при температуре 25 С и 1,98 мкг/103 при 37 С), чем для устойчивых (1,6 мкг/103 к.о.е. при температуре 25 С и 1,8 мкг/103 при 37 С). Аналогичная картина наблюдалась при изучении влияния полимиксина В на проницаемость клеток чумного микроба для лизоцима. За 1 ч инкубирования в растворе полимиксина В с лизоцимом при температуре 37 С клетки чувствительных штаммов Y. pestis лизировались на 50 %, а устойчивых - на 5 %. Сорбция полимиксина В очищенными ЛОС в большей степени хаpaктерна для препаратов, выделенных из чувствительных штаммов и выращенных при температуре 25 С.
Принято считать, что устойчивость к полимиксину В определяется присоединением арабинозы к фосфатным остаткам в составе липида А. Однако во всех изученных штаммах независимо от их чувствительности к полимиксину В преобладали популяции молекул ЛОС, к обоим фосфатным остаткам которых были присоединены арабинозные остатки. Содержание арабинозы находилось в обратной корреляции со способностью препаратов ЛОС, но не клеток, из которых они были выделены, связывать полимиксин В. Во всех устойчивых к полимиксину В штаммах выявлены популяции молекул ЛОС, в составе внутреннего отдела кора которых присутствовали четыре остатка гептозы. В чувствительных штаммах такие популяции молекул ЛОС отсутствовали.
Скрининг представительного набора природных изолятов Y. pestis, относящихся ко всем подвидам возбудителя чумы, подтвердил данные И.Л. Мартиневского и И.С. Аpaкеляна (1981) о том, что чувствительность к бактерицидному действию полимиксина В хаpaктерна для представителей подвидов caucasica и hissarica. Впервые показано, что свежие изоляты подвида altaica также чувствительны к действию полимиксина В, но утрачивают эту способность в процессе хранения. Возможно, что избирательная вирулентность штаммов Y. pestis подвидов altaica, caucasica и hissarica в значительной степени определяется их чувствительностью к антимикробным катионным пептидам, являющимся составным элементом системы врожденного иммунитета.
Работа выполнена в рамках партнерского проекта Международного научно-технического центра (ISTC) #1197p, поддержанного программой Cooperative Threat Reduction Департамента Обороны США.
Изучены видовой состав и экобиоморфы лишайников, проведена комплексная оценка роли экологических факторов в развитии лишайникового покрова карстовых воронок на территории Северо-Западного Кавказа. ...
30 04 2024 11:25:40
Статья в формате PDF 116 KB...
29 04 2024 7:36:41
Статья в формате PDF 123 KB...
28 04 2024 10:49:11
Статья в формате PDF 314 KB...
27 04 2024 6:32:12
Статья в формате PDF 130 KB...
25 04 2024 12:13:47
Статья в формате PDF 104 KB...
24 04 2024 10:20:38
Статья в формате PDF 137 KB...
23 04 2024 0:16:59
Статья в формате PDF 133 KB...
22 04 2024 18:16:28
Статья в формате PDF 138 KB...
18 04 2024 15:33:19
Статья в формате PDF 102 KB...
17 04 2024 19:24:23
Статья в формате PDF 113 KB...
16 04 2024 13:39:24
Статья в формате PDF 121 KB...
15 04 2024 6:23:12
Статья в формате PDF 116 KB...
14 04 2024 23:46:27
Статья в формате PDF 112 KB...
12 04 2024 3:33:17
Статья в формате PDF 476 KB...
11 04 2024 22:45:54
Статья в формате PDF 216 KB...
10 04 2024 1:26:52
Статья в формате PDF 253 KB...
09 04 2024 16:10:49
Статья в формате PDF 123 KB...
07 04 2024 9:46:45
Статья в формате PDF 273 KB...
06 04 2024 8:35:18
Статья в формате PDF 106 KB...
05 04 2024 9:13:40
Статья в формате PDF 126 KB...
04 04 2024 20:55:49
Статья в формате PDF 145 KB...
02 04 2024 0:37:37
31 03 2024 5:53:40
Статья в формате PDF 109 KB...
30 03 2024 13:47:58
Статья в формате PDF 185 KB...
29 03 2024 21:31:23
Статья в формате PDF 145 KB...
28 03 2024 17:33:35
В данной работе сделана попытка изучить механизм действия некоторых аналгезирующих и местных анестезирующих препаратов на нервно-мышечную передачу холоднокровных животных. Были исследованы aнaльгетики наркотического типа и локальные анестетики. Показано, что все исследованные препараты вызывали уменьшение амплитуды спонтанных биопотенциалов концевой пластинки, что указывает на их постсинаптическое воздействие. ...
27 03 2024 7:39:42
8 февраля 2004 года исполняется 75 лет со дня рождения и 60 лет педагогической, производственной деятельности академика Российской Академии естествознания, Академии эмалирования России, Заслуженного деятеля науки и техники РФ, почетного работника высшего образования России, доктора технических наук, профессора кафедры технологии керамики, стекла и вяжущих веществ ЮРГТУ (НПИ). ...
26 03 2024 10:39:52
Статья в формате PDF 111 KB...
25 03 2024 9:27:32
Статья в формате PDF 118 KB...
24 03 2024 20:17:20
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::