ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ГРАНУЛОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА, ПОДВЕРГАВШИХСЯ ХОЛОДОВОМУ ГИПО- И АНАБИОЗУ
Целью данной работы явилось изучение функционального состояния гранулоцитов донорских лейкоцитных концентратов, подвергавшихся холодовому гипобиозу (-100С) и холодовому анабиозу (-200С, -400С) с использованием оригинальных криозащитных растворов, не требующих отмывания от биообъекта и экспоненциальной программы охлаждения.
В состав незамерзающего хладоограждающего раствора для температуры -100С были включены следующие ингредиенты: криопротектор - глицерин, антиоксидантное средство -оксиметилэтилпиридина сукцинат (ОМЭПС), плазмозамещающий раствор - желатиноль, для доведения рН раствора до физиологической нормы 7,2-7,4 использован 2 м раствор NaOH.
Криозащитный раствор для замораживания лейкоцитов до -400С (патент РФ №2184449, 2001 г.) включал в себя: криопротектор - вещество А-378, антиоксидант - фумарат натрия и воду для инъекций, лимонную кислоту применяли для достижения рН раствора физиологической нормы.
При температуре -200С использовали раствор (патент РФ №2240000, 2004 г.), состоящий из криопротектора А-378, средства - ОМЭПС и воды для инъекций, рН раствора доводили до 7,2-7,4 с помощью 2 м раствора NaOH.
Каждый из указанных растворов смешивали в пластикатном контейнере в соотношении 1:1 с нативным донорским лейкоконцентратом, полученным путем цитафереза, выдерживали 20 мин при комнатной температуре и погружали в металлическую ванну, заполненную 960 этанолом, охлажденным до -100С (для гипобиоза) или до -280С (для анабиоза), которая находилась в электроморозильнике «Криостат». В опытах с температурой -400С (или -200С) контейнеры с биообъектом, охлажденные до -280С (или до -200С соответственно) затем переносили в холодильник на -400С (или на -200С) для дальнейшего замораживания. Экспоненциальные программы (ЭП) охлаждения (гипобиоз) или замораживания (анабиоз) биообъекта для каждой из исследуемых температур представлены на рис.1.
Таблица 1. Экспоненциальные программы (ЭП) охлаждения (гипобиоз) или замораживания (анабиоз) биообъекта
Охлажденный биообъект выдерживали при -100С до 14 суток, а замороженный при -200С до 110 суток и при -400С до 60 суток, после чего осуществляли отогрев или размораживание в 20-и литровой водяной ванне при температуре +380С в течение 2 сек (для -100С), 35-40 сек (для -200С) и 45-60 сек (для -400С) при интенсивном покачивании контейнера с биообъектом.
Установлено, что оптимальным сроком сохранения функции гранулоцитов охлажденных до -100С являются 12 суток (n=6), при которых в лейкоцитных концентратах сохраняется 82,18±3,64% гранулоцитов от исходного (до охлаждения) уровня, среди которых способностью к фагоцитозу (пробы с латексом) обладали 75,72±4,33% нейтрофилов.
Для температуры -200С оптимальным сроком являются 21 сутки (n=7), когда из 88,71±8,48%, размороженных гранулоцитов, фагоцитарная активность наблюдается у 71,67±10,82% нейтрофилов.
Наиболее благоприятным сроком сохранения функции гранулоцитов при -400С оказались 30 суток (n=7), через которые сохраненными оказались 87,29±10,83% гранулоцитов, среди них 96,0±4,00% нейтрофилов обладают способностью к фагоцитозу.
Таким образом, сохранение функции гранулоцитов крови человека возможно через разные сроки и при различных отрицательных температурах, если используются эффективные криозащитные растворы и щадящая программа охлаждения/замораживания. Предложенные криотехнологии являются доступными и не требуют дорогостоящего оборудования, поэтому могут найти применение в медицинских, микробиологических, ветеринарных и ихтиологических исследованиях.
Статья в формате PDF
324 KB...
30 04 2024 5:18:17
Статья в формате PDF
126 KB...
29 04 2024 17:57:55
Статья в формате PDF
109 KB...
28 04 2024 18:20:57
Статья в формате PDF
124 KB...
27 04 2024 20:46:44
Статья в формате PDF
112 KB...
26 04 2024 2:59:22
Статья в формате PDF
232 KB...
25 04 2024 19:50:55
Статья в формате PDF
126 KB...
24 04 2024 20:59:33
Статья в формате PDF
284 KB...
23 04 2024 14:11:47
Статья в формате PDF
307 KB...
21 04 2024 18:35:32
Проведено исследование ведущих показателей метаболизма порфиринов и железа в сопоставлении с функциональным состоянием печени у 100 больных с гемохроматозом (ГХ), в динамике. Дана объективная оценка их роли в своевременной и правильной постановке вторичной печеночной порфирии на ранних этапах развития патологического процесса. Порфириновый обмен при наследственном гемохроматозе (НГХ) хаpaктеризуется глубоко нарушенными и нестабильными показателями, затрагивающими все этапы синтеза гема гемоглобина (Hb). У больных с НГХ и с сопутствующими поздней кожной порфирией (ПКП) и инфекционными вирусными гепатитами В и С, независимо от типа мутации гена HFE (С289Y или H63D) изменения в обмене железа коррелируют с нарушенным синтезом аминолевулиновой кислоты (АЛК) и порфобилиногена (ПБГ). У больных диагностическую ценность в определении функционального состояния печени наряду с трaнcаминазами представляет исследование экскреции копропорфирина (КП) с мочой. Выявленные изменения в порфириновом обмене при гомозиготной форме НГХ носят постоянный, часто необратимый хаpaктер, ухудшая прогноз заболевания.
...
19 04 2024 13:12:44
Статья в формате PDF
116 KB...
18 04 2024 6:10:49
Статья в формате PDF 113 KB...
16 04 2024 12:10:54
Статья в формате PDF
99 KB...
14 04 2024 18:47:58
Статья в формате PDF
131 KB...
13 04 2024 21:51:22
Статья в формате PDF
104 KB...
12 04 2024 6:35:42
Статья в формате PDF
153 KB...
11 04 2024 14:37:16
Статья в формате PDF
232 KB...
10 04 2024 4:45:47
Статья в формате PDF
111 KB...
09 04 2024 20:23:53
Статья в формате PDF
115 KB...
08 04 2024 14:41:35
Статья в формате PDF
105 KB...
07 04 2024 2:22:34
Статья в формате PDF
106 KB...
05 04 2024 10:57:51
Изучено влияние молекул средней массы, выделенных из обожженной in vitro печени на каталитические и кинетические свойства альдегиддегидрогеназы. Показано, что молекулы средней массы выступают в роли ингибиторов активности исследуемого фермента в эритроцитах и цитозоле печени. Отмечена корреляция уменьшения активности эритроцитарной и цитоплазматической альдегиддегидрогеназы под влиянием молекул средней массы.
...
04 04 2024 2:17:24
Статья в формате PDF
131 KB...
03 04 2024 0:51:50
В статье изложены результаты тестирования ориентировочно-исследовательского поведения крыс указанных линий, которые показали, что крысы линии WAG/Rij обладают более выраженной двигательной активностью и исследовательской деятельностью по сравнению с крысами линии Вистар.
...
01 04 2024 19:52:14
Статья в формате PDF
94 KB...
29 03 2024 10:43:38
Статья в формате PDF
93 KB...
28 03 2024 1:19:34
Исследованы особенности взаимосвязи увеличения массы и продольных размеров тела и его частей у здоровых новорожденных (535), детей с задержкой внутриутробного развития (938) и 221 детей с отставанием в росте одной из нижних конечностей. Использованы методы антропометрии детей, ультразвуковое исследование плода и оценка психического развития дошкольников. В этих группах обследуемых выявлены хаpaктерные различия динамики продольных размеров тела, отнесенных к его массе. Показано, что церебральный тип конституции появляется у детей при отсутствии диспластической задержки роста тела. Для успешного психического развития дошкольников благоприятны не максимальные, а средние размеры тела детей.
...
25 03 2024 10:29:21
Статья в формате PDF
311 KB...
24 03 2024 13:49:35
Статья в формате PDF
119 KB...
23 03 2024 17:15:42
Еще:
Поддержать себя -1 :: Поддержать себя -2 :: Поддержать себя -3 :: Поддержать себя -4 :: Поддержать себя -5 :: Поддержать себя -6 :: Поддержать себя -7 :: Поддержать себя -8 :: Поддержать себя -9 :: Поддержать себя -10 :: Поддержать себя -11 :: Поддержать себя -12 :: Поддержать себя -13 :: Поддержать себя -14 :: Поддержать себя -15 :: Поддержать себя -16 :: Поддержать себя -17 :: Поддержать себя -18 :: Поддержать себя -19 :: Поддержать себя -20 :: Поддержать себя -21 :: Поддержать себя -22 :: Поддержать себя -23 :: Поддержать себя -24 :: Поддержать себя -25 :: Поддержать себя -26 :: Поддержать себя -27 :: Поддержать себя -28 :: Поддержать себя -29 :: Поддержать себя -30 :: Поддержать себя -31 :: Поддержать себя -32 :: Поддержать себя -33 :: Поддержать себя -34 :: Поддержать себя -35 :: Поддержать себя -36 :: Поддержать себя -37 :: Поддержать себя -38 ::
